Wie funktionieren Nicht homologe Rekombination und Homologe Rekombination?

Den groben Ablauf habe ich schon verstanden, aber wie genau funktionieren diese zellulären Reparaturmechanismen? Und warum benutzt man NHEJ zum Ausschalten eines Gens, es entstehen doch Mutationen, dh. das Gen mutiert und wird nicht ausgeschaltet (knock-out), oder? Wäre sehr dankbar über schnelle (und richtige :) ) Antworten

Answer 1

[Agronom]

Beim NHEJ nutzt man eben genau die Schäden, die bei der Reparatur entstehen können, denn Mutation sind meist "negativ", führen also zum Funktionsverlust des Gens, dabei muss man dann natürlich auch selektieren, da es nicht immer zum Funktionsverlust kommt.

Die HR ist etwas aufwendiger, dabei wird anhand eines homologen Templates der Bruch wieder "geflickt". Bei der Gentechnik nutzt man das zur Insertion neuer/veränderter Sequenzen, dazu wird die neue/veränderte Sequenz (mind. 1 Base) links und rechts mit homologen, also gleichen Sequenzen der DNA des Organismus versehen. Bei der DNA-Reparatur werden dann diese sog. "homologen Arme" erkannt und das ganze Template zur Vervollständigung der zerschnittenen DNA verwendet.

Bild: http://finkelsteinlab.org/research