Was sind die möglichen Ursachen für unscharfe Objekte unter dem Mikroskop?

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Unter einem Lichtmikroskop kann man leider keine 3 Dimensionalen Objekte betrachten, da man immer nur einen bestimmten Bereich scharf-stellen kann.

bei der klassischen Lichtmikroskopie muss man die Obejkte in hauchdünne Scheiben schneiden.