Bestimmung des Proteingehaltes?
In meinem Skript steht bei der quantitativen Bestimmung des Proteingehaltes diese Bestimmung. Für mich macht das mit der Asche keinen Sinn, sollte da nicht anorganisch stehen, statt organisch?
1 Antwort
Es wird hier unterschieden zwischen Rohprotein und Reinprotein. Das Rohprodukt ist das gewaschene und getrocknete Fällungsprotein, welches noch mineralische Bestandteile enthält. Wird das Rohprotein im Anschluss an die Auswaage verascht, bleibt der mitgefällte Mineralstoffanteil als Asche zurück. Die Ascheauswaage wird von der Auswaage des Rohproteins abgezogen = Reinprotein.
Etwas ungewöhnlich erscheint mir aber der Fällungsprozess im Acetatpuffer. Es ist zwar richtig, dass die Löslichkeit von Proteinen am isoelektrischen Punkt (IP) ein Minimum aufweist, das heißt aber nicht, dass das Protein gänzlich unlöslich ist. Ich kann mir nicht vorstellen, wie es dabei quantitativ gefällt werden kann. Aus der Biochemie kenne ich Fällungsmethoden mit Trichloressigsäure oder mit Ammoniumsulfat. Aber nur durch pH-Einstellung auf den IP ist mir keine Fällungsmethode geläufig.
Vielen Dank!! Kann es sein dass der pH-Wert mit Acetat eingestellt wird und dann das Protein mit Trichloressigsäure gefällt wird ?